Набір фарб для мікроскопії мазків м’яса
№ | Назва реактиву | Назва НТД | Термін придатності | Розмір фасування |
1 | Карболовий фуксин Циля | ГОСТ 21237-75 | 1 рік | флакон 20 мл |
2 | Карболовий генціанвіолет | ГОСТ 21237-75 | 1 рік | флакон 20 мл |
3 | Фарба по Ребігеру | ГОСТ 21237-75 | 1 рік | флакон 20 мл |
4. | Фарба по Романовському-Гімзе | ГОСТ 21237-75 | 1 рік | флакон 10 мл |
5. | Фарба по Міхіну | ГОСТ 21237-75 | 2 роки | флакон 10 мл |
6. | Фарба по Муромцеву | ГОСТ 21237-75 | 1 рік | флакон 10 мл |
7. | Сафранін Т | ТУ 6-09-4029-77 | 3 роки | флакон 2 г |
8. | Калій йодистий | ГОСТ 4232-74 | 3 роки | 2 флакони по 1 г |
9. | Йод кристалічний | ГОСТ 4159-79 | 3 роки | 2 флакони по 0,5 г |
10. | Олія імерсійна | ГОСТ 13739-78 | 1 рік | флакон 3 мл |
Виготовлення робочих розчинів:
1. Розчини фарб (карболовий фуксин Циля, карболовий генціанвіолет, фарба по Ребігеру, фарба по Романовському-Гімзе, фарба по Міхіну, фарба по Муромцеву) поста-чаються готовими для проведення бактеріоскопічних досліджень.
2. Фарба по Ольту - 2 г сафраніну вносять в мірну колбу ємністю 100 см³ і доводять до мітки 100 мл дистильованою водою. Розчин готують перед використанням.
3. Розчин Люголю - в 10 см³ дистильованої води розчиняють 1 г йодистого калію і додають 0,5 г кристалічного йоду. Розчин витримують 5-6 годин до повного розчинення йоду, після чого прибавляють 140 см³ дистильованої води. Розчин зберігають у склянці з темного скла 7 днів.
4. Водний розчин фуксину - до 1 мл фуксину Циля додають 9 мл дистильованої води. Розчин готують перед використанням. Стабільний до 12 годин.
5. Водний розчин фарби Романовського - Гімзе - до 1мл фарби Романовського - Гімзе додають 9 мл дистильованої води. Розчин готують перед використанням
Техніка приготування мазків для дослідження:
1. Із паранхіматозних органів (печінки, нирок, селезінки) лімфатичних вузлів туші або із уражених органів та тканин готують 2-10 мазків - відбитків. Мазок висушують на повітрі.
2. Фарбування мазків по Граму. На фіксований мазок (фіксують шляхом триразового проведення скельця над полум'ям спиртівки) кладуть фільтрувальний папір, потім наливають карболовий генціанвіолет. Ви-тримують 1-2 хвилини, після чого знімають папір, зливають фарбу, мазок не промивають водою і наливають на нього розчин Люголю (мазок чорніє). Через 1-2 хв розчин зливають і мазок промивають 96 % етиловим спиртом до тих пір, поки спирт, що стікає, не буде безкольоровим. Мазок промивають водою і додатково фарбують водним розчином фук-сину (п.п 2.4.) або водним розчином сафраніну (п.п. 2.2.) протягом 1 - 2 хв. Мазок проми-вають водою і просушують в повітрі.
3.Фарбування капсул методом Ребігера. При фарбуванні по Ребігеру мазок не фіксують. Фарбують нефіксовані мазки протягом 15-20 секунд, швидко промивають водою і висушують фільтрувальним папером.
4. Метод фарбування за Романовським – Гімза. Фіксований препарат кладуть мазком донизу в скляну бактеріологічну чашку на «рельси» зі скляних паличок, під мазок підливають розчин фарби Романовського - Гімза та фарбують 40 - 50 хв, обережно промивають водою та висушують.
5. Метод фарбування за Міхіним. Фіксований препарат фарбують протягом 6 - 7 хв 1% розчином метиленового блакитного з легким підігріванням над полум'ям ( до появи пари ). Ледь промивають водою, швидко просушують фільтрувальним папером і мікроскопують.
6. Метод фарбування по Муромцеву. Мазок фіксують 10 хв. в суміші спирту ( 80 частин ) з формаліном ( 20 частин ), фарбують 30 секунд фарбою Муромцева, промивають водою та висушують.
7.Фарбування капсул методом Ольта. Мазки фарбують 2% - ним водним розчином сафраніну протягом 1 - 3 хв і швидко зми-вають водою.